熒光顯微鏡是以紫外線為光源,用以照射被檢物體,使之發出熒光,然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。主要用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。細胞中有些物質,如葉綠素等,受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經紫外線照射亦可發熒光。
熒光顯微鏡觀察到的熒光圖像具有形態特征,具有熒光顏色和亮度。在判斷結果時,要結合起來作出的判斷。結果是根據主觀指標,即工人的眼睛來記錄的。作為一般的定性觀測,它基本上是的。隨著科技的發展,客觀指標被用來記錄判斷結果,如使用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但是,這些文書所記錄的結果也要與主觀判斷相結合。
熒光顯微鏡的常見問題回答:
1、為什么目鏡下觀察到的圖像只有一半兒?
出現這種情況的原因一般是CT環調整出現了問題。CT環位于目鏡下方,也叫合軸調中目鏡,有CT/O/S三個參數設置。CT對應的是光路對準了望遠鏡;O對應的是光路中沒有物體;S對應的是光路中有遮光板。那么上述情況就是CT環這個螺旋位于CT和S兩個參數之間。
2、為什么白光觀察下的物體特別暗?
環狀光闌沒有開至大光圈。環狀光闌位于光源和聚光器之間,使光線透過聚光器聚焦到標本上;或者是光強調節旋鈕處于關閉狀態。
3、正確觀察熒光的步驟?
關閉室內的燈光,打開白光電源和汞燈電源,一般汞燈需要提前打開10分鐘預熱才能達到亮;關閉熒光shutter,用低倍鏡找到細胞位置;關閉透射光按鈕,打開熒光光路shutter,旋轉熒光濾色轉盤;電腦顯示器中觀察。熒光光路shutter要后打開,先關閉,這樣可以保護樣本,避免過度的熒光猝滅。
4、無論怎么調整細準焦螺旋,鏡下的圖像都不清楚?
這種情況下很可能是鏡頭不干凈,可以用酒精棉擦拭一下鏡面。另外高倍數的物鏡鏡頭外也有一個旋鈕,適當旋轉這個旋鈕也會使畫面變得清晰。
5、正確觀察白光的步驟?
將標本置于載物臺上,打開電源開關;將轉盤聚光器調整到明視場,然后將環狀光闌調整到大光圈;從低倍鏡開始觀察。
好了,以上便是關于熒光顯微鏡的相關內容介紹了。